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上海申安論述檢測水質大腸菌的方法!

導讀:本文上海申安醫療器材廠解析了快速檢測水質中大腸菌群含量的方法。


返回列表 來源:未知 發布日期:2019-08-08 16:41【
上海申安總大腸菌群是衡量水質狀況的重要指標之一。總大腸菌群包括大腸桿菌、大腸菌等多種長期存在于人體腸道的細菌,因此,在人體糞便中存在大量的總大腸菌群,可以作為水質衡量標準,如總大腸菌群含量超過國家標準,則表示水質被污染,可能存在致病風險。在傳統的水質監測種,常以多管發酵法、平板計數法進行檢測,該方法費時費力,在水樣較多且時間有限的情況下,難以滿足水質總大腸菌群快速檢測的要求。1995年,德國學者FJ·Forg發明了紙片法,能夠實現總大腸菌群的快速檢測,將水質檢測時間由多管發酵法的72h縮短到24h,材料成本大幅度降低,并有效簡化了操作流程,取得了良好的應用實踐效果。本文上海申安醫療器械廠深入研究了紙片法在檢測水質總大腸菌群含量測定中的應用,并與常規的平板計數法進行對比研究。

1紙片法原理
紙片法是以濾紙片、紙膜和膠片等作為培養基載體,并加入適量的氯化三苯四氮(TTC)溶于水中制備成的無色溶液。由于細菌細胞內含有脫氫酶,在脫氫酶的作用下,TTC接受氫生成紅色且不溶于水的三苯甲胺,三苯甲胺性狀較為穩定且不會自動氧化,能夠使菌落呈現紅色標記。同時,在紙片培養基中加入乳糖和澳甲酚紫,菌群分解乳糖產酸會導致澳甲酚紫產生顏色變化,菌落周圍產生黃圈,大腸菌群菌落呈現紅斑黃圈,以此作為大腸菌落檢測的判定標準。

2試劑與設備
本實驗采用自制紙片方法,選用中速定性厚濾紙、中速定性薄濾紙,為杭州新華紙業公司生產,采用北京奧博星公司生產的酵母提取物,TTC為上海青析公司生產,溴甲酚紫為上海三愛思公司生產。實驗儀器包括:電熱鼓風干燥箱DHG-9240A,購于上海智誠分析儀器公司,立式壓力蒸汽滅菌器LDZF-75KB-Ⅱ,購于上海申安醫療器械廠,S220多參數測試儀購于梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司


上海申安LDZF-75KB-II立式壓力蒸汽滅菌器
3結果與討論
通過平板計數法、自制紙片和3M紙片進行總大腸菌群檢測,得出結果如下:
上海申安醫療器材廠通過對比分析紙片法與平板計數法,檢測結果無統計學意義,沒有顯著差異。同時,由于自制紙片存在一定的間隙,如菌體處于纖維之間時,可能出現未計數的情況,由此造成一些情況下紙片法菌群計數量稍小于平板計數法。過量TTC試劑對細菌有抑制作用,通過對比研究,自制紙片時培養基中TTC含量應控制在80左右。同時,在培養基中加入5mg/mL的葡萄糖和3mg/mL的牛肉浸膏,能夠有效提高自制紙片檢測的靈敏度。與多管發酵法、平板計數法相比,紙片法具有攜帶方便、檢測方法簡單、準確度高、成本低等特點,易于消毒保存,便于運輸,加之紙片法使用中沒有廢液、廢氣產生,使用后可焚燒銷毀,大大降低了對環境的污染,減少了試驗后清洗工作量,適用于實驗條件不滿足的企業、單位作為水質監測手段日常使用。
以上內容僅供參考。


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